HE上色(hematoxylin-eosin staining)主要用于生物医学,是由偏碱染液苏木精和酸性染液伊红组成的染色方法。
在HE上色中,苏木精使细胞核中的染色质和细胞内的核酸呈紫蓝色,伊红使细胞质和细胞外基质中的成分呈红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学和科学研究中最基本、最常用的技术方法。
1适用范围组织学、胚胎学、病理学教学与科研。
2原理易于被偏碱或酸性染料着色的特性称为嗜碱性染料( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );碱性染料和酸性染料感染力差的情况称为中性染料(neutrophilia)。
组织中的蛋白质构成蛋白质的氨基酸有很多种,它们有不同的等电点。在传统的染色方法中,染色液的pH6上下,细胞中的酸性物质,如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞中的粗内质网和透明软骨基质,都被碱性染料染色,称为嗜碱性。血细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞颗粒、纤维细胞和肌纤维等细胞质中的其他蛋白质被酸性染料染色,称为嗜酸型。如果改变染色液的pH值,当pH值升高时,原来被酸性染料染色的物质可以变成嗜碱性;当pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质可以变成嗜酸性。,染色液的pH值会影响染色的反应。
脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电,偏酸,容易与带正电的苏木精碱染料与离子键混合着色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种有机合成的酸性染料,在水中分解成负电阳离子,与蛋白质氨基正电正离子、细胞浆、血细胞、肌肉、结缔组织、嗜红颗粒染色一定程度的红色或浅粉色,与蓝细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的优良染料。
由于不同的组织或细胞成分对苏木精有不同的感染力和着色性质。苏木精着色后,细胞核和钙盐粘液呈蓝色,硫酸乙醇分裂和弱碱性溶液可呈蓝色。如果解决方案合适,细胞核可以清晰地褪色暗蓝色、细胞浆和其他成分。伊红染胞浆再利用细胞浆染剂,使细胞浆的各种不同成分呈现出不同深度的浅粉色。,可以显示各种组织或细胞成分和病变的一般形态结构特征。